Castlevania: Lords of Shadow se odehrává v době, kdy se svět ocitl na pokraji zániku. Spolupráce mezi Nebem a Zemí je narušena temnou silou známou jako Páni stínu, a temnota postupně pohlcuje vše živé. Duše mrtvých nenacházejí klid a potulují se zničenou krajinou, zatímco bytosti zla šíří chaos a smrt.

Hlavním hrdinou je Gabriel, člen Brotherhood of Light, elitního řádu svatých rytířů chránících lidstvo před nadpřirozenými hrozbami. Gabrielova milovaná žena byla brutálně zavražděna silami temnoty a její duše je uvězněna mimo dosah věčného odpočinku. Přesto dokáže varovat Gabriela před tím, co je v sázce, a vede ho na cestě, která může zachránit svět — i když za cenu, jež může být nesmírně vysoká.

Gabriel se vydává na cestu napříč rozervanou zemí, kde musí porážet mocné tyrany, aby získal jejich schopnosti a obnovil rovnováhu světa. Vyrazí do boje vyzbrojen univerzálním bojovým křížem a jako poslední naděje lidstva se postaví třem frakcím Pánů temnot, aby ukončil jejich bezbožnou vládu jednou provždy.